abts自由基清除能力的测定结果_清除自由基功能的测定实验报告

1.揭秘桦褐孔菌鲜为人知的特殊功效

2.自由基清除实验为什么选择dpph和as

3.ABTS+测抗氧化性原理是什么

4.抗氧化性怎么检验

5.芝麻叶知识介绍？

1、ORAC

ORAC是Oxygen Radical Absorption Capacity（氧化自由基吸收能力）的缩写，是一种测试抗氧化能力的评价方法体系。

ORAC抗氧化测试包括对：过氧化自由基（含亲水性、亲脂性）、羟基自由基、过氧亚硝基、单线态氧、超氧阴离子 这五种人体最主要的活性氧自由基进行全面的分析，能有效得出样品的抗氧化实际能力及分布情况。

ORAC抗氧化生物测试是比普通抗氧化测试的更高一层的测试方案。利用人体细胞有效测试出样品的抗氧化力（生物利用度）。

2、其他评价方法

抗氧化不仅仅是一个概念，对生物体抗氧化的效果是可以量化测定的，作为动物实验一般是服用抗氧化剂一定时间后，测定血液中的酯质过氧化产物丙二醛变化、以及肝脏匀浆中超氧化物歧化酶SOD和谷胱甘肽过氧化物酶GSH-PX的活力变化。

从上述两种酶和MDA的变化状况来判定抗氧化的强度及效果。作为人体不可能测肝脏匀浆，可以测定血液或者尿液中的MDA，以及血液中的SOD、GXH-PX来判定抗氧化的效果。

3、抗油脂过氧化力测定

脂类包括的范围很广，构成生物膜的主要成分，脂类中的不饱和脂肪酸可以过氧化，脂类过氧化过程中会产生L、LO、LOO-等自由基以及LOOH，这些产物会损伤生物细胞。因此，能够抑制脂类过氧化具有重要的生物学意义。

A硫氰酸铁法FTC：硫氰酸铁盐(FTC)比色法是基于在酸性条件下，脂质氧化形成的过氧化物可将Fe2+氧化成Fe3+，然后Fe3+与硫氰酸根离子可形成在480-515nm内有最大吸收的红色络合物。通常用500nm处吸光值的高低表示物质抗脂质过氧化的能力，吸光值越小，表明物质的抗脂质过氧化能力越强。

B硫代巴比妥酸反应物TBARs法：是评价油脂的氧化程度的常用方法。油脂或者亚油酸氧化后的终产物主要是丙二醛，这些过氧化产物与硫代巴比妥酸作用生成有色化合物，该有色化合物在530 nm左右有吸收。

4、清除DPPH能力的侧定

DP是一种早期合成的有机自由基，常用来评估抗氧化物的供氢能力，它在有机溶剂中非常稳定，呈紫色，而且在处有一个特征吸收峰，当遇到自由基清除剂时，DPPH的孤对电子被配对而使其退色，也就是在最大吸收波长处的吸光值变小。因此，可通过测定吸光值的变化来评价样品对DPPH自由基的清除效果。

5、还原能力的测定

还原力的测定是检验样品是否是良好的电

揭秘桦褐孔菌鲜为人知的特殊功效

dpph自由基清除原理：

DPPH自由基有单电子在517nm处有一强吸收其醇溶液呈紫色的特性，结论， DPPH法名称:1，它的稳定性主要来自3个苯环的共振稳定作用及空间障碍。

中文名：22联氮二(3乙基苯并噻唑6磺酸)二铵盐别名：22’连氮基双(3乙基苯并二氢噻唑啉6磺酸)分子式：C18H24N6O6S4分子量：54868ABTS法是使用最广泛的间接检测方法，当有自由基清除剂存在时由于与其单电子配道对而使其吸收逐渐消失其褪色程与其接受的。

dpph性质应用：

DPPH具有几个不同结晶形态，它们的晶格对称性和熔点(m.p.)存在差异。商品化的粉末是不同晶相的混合物，熔点在130℃附近。DPPH-Ⅰ(m.p. 106℃)是正交晶系，DPPH-Ⅱ(m.p. 137℃)是无定形态，DPPH-Ⅲ(m.p. 128-129℃)是三斜晶系。

DPPH是一种很稳定的氮中心的自由基，它的稳定性主要来自3个苯环的ππ共-轭作用及空间障碍，使夹在中间的氮原子上不成对的电子不能发挥其应有的电子成对作用。作为一种稳定的自由基，DPPH可以捕获("清除")其他的自由基。

因此通过加入DPPH后观察某一化学反应的速率是否减慢，来作为这一反应是否具有自由基反应本质的指标。由于DPPH自由基在以300~400之间为中心处具有强烈的吸收，因此在溶液中呈现深紫色，并且在被中和之后会变为无色或浅**。

利用这一特性可以直观地检测反应的过程，通过记录DPPH在在520nm吸光度值或者EPR信号的变化可以得到初始自由基的量。

自由基清除实验为什么选择dpph和as

桦褐孔菌(Inonotus obliquus)生于白桦、银桦、榆树、赤杨等活立木的树皮下或砍伐后树木的枯干上,其菌核可以在砍伐后的枯干上生存达6年之久。它主要分布在北美(北部)、芬兰、波兰、俄罗斯(西伯利亚、远东部分地区、勘察加半岛)、中国(黑龙江省、吉林白山地区)、日本(北海道)等国家。俄罗斯人认为,桦褐孔菌是上帝赐给苦难人类的一种神奇的礼物,可用来防治肝癌、艾滋病、0-157大肠杆菌中毒。日本的研究人员高度评价桦褐孔菌,称其为一种“万能药”。

1955年莫斯科医科院(The Medical Academyof Science in Moscow)宣布桦褐孔菌为抗癌物质,批准桦褐孔菌可用于医药品开发。美国把桦褐孔菌列入“特殊的天然物质”,作为宇航员的未来饮品。日本则把桦褐孔菌作为肝癌、艾滋病和0-157大肠杆菌中毒的治疗剂,并申请多项有关桦褐孔菌的专利。

桦褐孔菌(Inonotus obliquus)是主要产于俄罗斯的一种药用型真菌,包含多种活性物质如羊毛甾醇三萜类、桦褐孔菌醇、桦褐孔菌素、多糖、木质素、生物碱、栓菌酸和黑色素等。桦褐孔菌被应用于各种疑难杂症,其入药部位主要是菌核,大量药理实验表明其有抗氧化、调节血脂、抗癌症(肝癌、胃癌、肺癌、宫颈癌、乳腺癌、直肠癌)、治疗糖尿病、抗、抗衰老和增强免疫力等作用。

桦褐孔菌的功能特性：

1、抗癌作用

用MTT法检测桦褐孔菌多糖对Jurkat和Daudi细胞增殖的影响,建立Jurkat荷瘤裸鼠模型,研究给药后对荷瘤裸鼠的抗肿瘤作用。表明桦褐孔菌多糖在体外具有直接杀死Jurkat和Daudi肿瘤细胞的作用,最高抑制率分别为62.29%和66.42%,具有良好的剂量-效应关系,同时具有显著的体内抗肿瘤活性,大小剂量对Jurkat荷瘤的抑制率分别为43.52%和57.48%,并且能显著提高裸鼠的脾脏指数,桦褐孔菌多糖具有显著的抗肿瘤活性和增强免疫功能。

2、护肝作用

通过桦褐孔菌多糖作用在荷瘤鼠身上，发现桦褐孔菌多糖(IOPS)对正常肝细胞LO2细胞无明显抑制作用，桦褐孔菌多糖(IOPS)可明显改善荷瘤鼠肝细胞的变形坏死,具有显著的保肝作用。

3、降血糖作用

实验表明桦褐孔菌多糖有效缓解糖尿病小鼠体重下降、血糖升高的症状,提高小鼠血浆胰岛素、丙酮酸激酶活性,促进葡萄糖的吸收,加速糖代谢。桦褐孔菌胞内多糖显著提高小鼠肝脏、肌肉糖原合成,抑制糖原降解,增加组织糖原含量,借此推断桦褐孔菌可能是通过影响体内葡萄糖吸收、摄取、代谢、降解等过程,抑制糖原代谢,加速糖原合成,同时增加外周组织糖消耗,达到降低小鼠血糖的目的。

4、抗氧化

利用FRAP、DPPH·、ABTS+·三种方法测定其抗氧化活性。实验表明桦褐孔菌黄酮类化合物浓度为200μg/m L时,其总抗氧化能力相当于464.53μmol/L Fe SO4。对DPPH自由基清除率的EC50为36.44μg/m L;对ABTS+自由基清除率的EC50为299.89μg/m L。桦褐孔菌中黄酮类化合物对DPPH·和ABTS+·的清除率接近维生素C（VC）,具有较强的抗氧化活性,有潜力作为天然抗氧化剂推广应用。

5、调节免疫力

研究发现,桦褐孔菌的水提取液可使LDH、HBDH、MDH、GCT的活性降低,过氧化氢酶的活性增强,可清除体内的自由基,保护细胞、延长传代细胞的分裂代数,增进细胞寿命,促进代谢,因而能有效地延缓衰老,长期服用可延年益寿。

6、其它作用

日本有关报道指出,桦褐孔菌对呕吐、腹泻、胃肠功能紊乱、胃及十二指肠溃疡、肝炎、胃炎和肾炎有一定的治疗作用。对因不合理的饮食而导致的骨质方面的疾病有一定的预防和治疗作用。桦褐孔菌还可防治高血压,而且是血液的清洁剂和疼痛的缓解剂,对皮肤过敏也有一定的疗效。

ABTS+测抗氧化性原理是什么

中文名：2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐别名：2,2’-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)分子式：C18H24N6O6S4分子量：548.68ABTS法是使用最广泛的间接检测方法，可用于亲水性和亲脂性物质抗氧化能力测定。ABTs经氧化后生成稳定的蓝绿色阳离子自由基ABTs+·，能溶于水相或酸性乙醇介质中，在414、645、734和815nm处有最大吸收。被测物质加入ABTS+·溶液后，所含抗氧化成分能与ABTs+·发生反应而使反应体系褪色。在ABTs+·的最大吸收波长(一般选择734nm)检测吸光度的变化，并与6-羟基-2，5，7，8．四甲基苯并二氢吡喃-2一羧酸[类似于Ⅶ的水溶性物质]标准对照体系比较就能换算出被测物质总的抗氧化能力(TEAC值，即每分子抗氧化物质捕捉ABTS+·的数目)。

抗氧化性怎么检验

ABTS+测抗氧化性原理是通过漆酶氧化ABTS的速率来决定漆酶酶活力的大小。

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,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐，如果与过二硫酸钾反应，可以生成绿色的ABTS自由基。该自由基在734nm有最大吸收，所以，通过检测734nm的吸光度，可以测定的其浓度。

一个物质加入到ABTS自由基溶液后，如果734nm的吸光度降低，则说明该物质具有自由基清除活性，属于抗氧化剂。该法称为ABTS自由基清除法，可以用评价植物（或中草药抽提物）、纯化合物的抗氧化能力的。

此外，可以对血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液或各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力进行检测的试剂盒。

扩展资料

以ABTS（7mmol, 10 equiv.）+K2S2O8(4.9mmol, 7

equiv.)的水溶液按1:1的体积比混合，避光情况下储存12-16h，第二天以乙醇稀释40-60倍，摇匀，静置5min，放入比色皿中测734nm的吸光度（0.7左右）。

测试吸光度随时间变化关系，时长为30min，发现吸光度有很明显的下降，30min大概降到0.45左右，换做水稀释时，吸光度下降更为严重，30min大概降到0.15左右。后面要测特定物质湮灭自由基的能力，这种情况势必严重干扰结果。

不过，ABTS自由基的生成需要过二硫酸钾氧化，所以，是一个混合物。而且，反应通常需要12小时，比较耗时。用PTIO自由基替代ABTS自由基进行实验，取得不错的实验结果。PTIO自由基不需要氧化，可以现成的化学品溶于水配制，另外，由于反应是在水溶液或者缓冲液中进行，具有更强的生物相关性。

百度百科-ABTS

芝麻叶知识介绍？

FRAP，ABTS以及ORAC法等等；

FRAP：即"亚铁还原能力实验"，一种在低pH条件下，利用亚铁离子与TPTZ生成蓝紫色复合物来测量样品抗氧化能力的实验，广泛运用于食品与保健品的抗氧化能力分析；

ABTS：总抗氧化能力检测试剂盒(ABTS法)，即Total Antioxidant Capacity Assay Kit with ABTS method，简称T-AOC Assay Kit，是一种用2,2'-azino-bis作为显色剂，可以对血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力进行检测的试剂盒;

ORAC：ORAC是氧化自由基吸收能力的缩写，氧化自由基吸收能力又称为抗氧化能力。ORAC分析方法是根据自由基破坏荧光探针，使荧光强度产生变化原理，以维生素E水溶性类似物Trolox为定量标准，使用荧光微孔板分析仪进行分析。荧光强度的变化大小反映自由基破坏的程度。在抗氧化剂存在时，它可以抑制由自由基引起的荧光变化。抑制程度反映了它对自由基的抗氧化能力。

芝麻叶干基中含有丰富的蛋白质(31.32%),共含有17种氨基酸(21.44%)，其中谷氨酸（2_86%)、天冬氨酸（2.21%)、亮氨酸(2.18%)的含量最高，且含有7种人体必需氨基酸(8.89%)。芝麻叶中总糖含量（25.26%)较高。芝麻叶中含有葡萄糖、甘露糖、半乳糖、木糖、鼠李糖等成分，其中葡萄糖最多，甘露糖最少。芝麻叶中灰分（9.24%)也比较丰富，钾(24.75mg/g)、钙(24.14mg/g)、镁(6.533mg/g)、磷(5.469mg/g)的含量较高，钠（0.869mg/g)、铁(0.312mg/g)、锰（0.135mg/g)次之，还含有一定量的硒（0.2pg/g)。芝麻叶中粗脂肪含量为7.54%，从中检测出5种主要脂肪酸，分别是亚麻酸(45.20%)、棕榈酸（19.80%)、亚油酸（12.40%)、油酸(5.14%)和硬脂酸（2.90%)。总之，芝麻叶中含有丰富的蛋白质，其必需氨基酸含量较高且均衡性好;富含多糖;富含钾、钙等矿物质，且比例适宜、易于吸收;丰富的脂肪中含有较高的人体必需脂肪酸—亚麻酸和亚油酸，可以作为天然的优质营养源。

功效与作用

1.抗氧化

对芝麻叶多糖的抗氧化活性研究表明,芝麻叶多糖对二苯基苦味基肼自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基都有较强的清除能力，其中对?OH的清除能力最强，且强于维生素C,表现出较强的抗氧化活性。对芝麻叶多酚的抗氧化性能进行研究，得出芝麻叶多酚能较强地清除DPPH?。芝麻叶多酚还有很强的乙基苯并噻唑啉磺酸自由基（ABTS+*)清除能力及抑制脂质过氧化能力，体现出显著的抗氧化活性，且与多酚的含量呈量效关系。芝麻叶中的4个酚类官能团，鉴定出其具有很强的自由基清除能力。对芝麻叶进行乳酸发酵，发酵后芝麻叶表现出更强的抗氧化作用。芝麻叶作为新型天然抗氧化原料开发有待进一步研究与探讨。

2.预防糖尿病

利用AB-8大孔吸附树脂柱对芝麻叶多酚粗提物进行高效纯化，纯化产物分别命名为SPP1和SPP2,研究得出芝麻叶多酚粗提物、SPP1和SPP2能延缓蛋白质非酶糖基化进程，具有预防或治疗糖尿病的作用。芝麻幼叶中鉴定出7种多酚类物质,其中麦角甾苷和异麦角甾苷表现出强体外抗糖活性，且麦角皂苷随着芝麻的生长而逐渐积累。研究表明干芝麻叶中主要含有没食子酸、绿原酸、芹菜素、咖啡酸、对香豆酸、麦角皂苷、木犀草素、山奈酚8种酚类化合物，其对《-葡萄糖苷酶有明显的抑制作用，可以作为预防糖尿病的膳食功能因子。芝麻叶提取液中分离出两种化合物3-表巴特原酸和表没食子酸儿茶素,这两种化合物对淀粉酶有较强的抑制作用，能降低糖尿病患者的血糖水平。

3.治疗急慢性咽炎

急慢性咽炎是人群中十分常见的一种咽部疾病。将新鲜的芝麻叶嚼烂，敷在咽部凹凸不平的红肿黏膜表面，芝麻叶中的有效成分可以直达病灶处，快速地达到治疗急慢性咽炎的目的。20世纪90年代就已经有学者提出芝麻叶可以治疗急慢性咽炎。用芝麻叶治疗急慢性咽炎，患者均出现好转或痊愈，有效率达100%,且痊愈率远远大于好转率，芝麻叶也未体现出任何毒副作用。综合表明，芝麻叶可以治疗急慢性咽炎且表现出较好的疗效,可以临床推广应用。

4.治疗心血管疾病，抵抗肥胖

芝麻叶水提物(ESem)与乙酰胆碱（ACh)对豚鼠主动脉制剂（GPAPs)的松弛作用，以确定其在心血管疾病传统药物中的应用，结果表明:芝麻叶水提物在具有完整内皮的GPAPs中可引起分级松弛，适当浓度范围内与ACh的作用相同，证实了其在心血管疾病治疗中的功效。芝麻叶提取物（SIE)对高脂饮食(HFD)诱导的肥胖的保护作用，结果表明:SIE通过激活脂肪组织中的AMP依赖的蛋白激酶来抑制体重增加及降低血清葡萄糖、甘油三酯和瘦素水平，以达到抵抗肥胖的作用。